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产品介绍
 
一个载体编码4条shRNA质粒同时过表达2个基因 (晶赛公司专利技术)
技术简介:  4个不同哺乳动物启动子(hU6、hH1、mU6和h7SK)分别操纵的shRNA转录结构单元(启动子-shRNA正义链-loop环-shRNA反义链-终止信号)构建到一个RNAi载体中,实现了一个载体编码4条shRNA。不同启动子转录各自相应的shRNA结构单元,有效避免意外重组,而且每条shRNA能够有效转录。还可以同时在该载体中表达2个基因。

 

产品特点:
1. 免除shRNA有效序列筛选
  随着RNAi实验经验积累,专业RNAi公司通常能做到设计的每3个shRNA中,有一个针对目标基因的抑制效率达到70%或更高。在此基础上,一个载体编码4个shRNA专利产品基本可以做到每个产品都是有效的,免除了siRNA有效序列筛选实验。本公司使用该技术对50个基因设计的shRNA,49个基因干扰效率达到90%以上。
 
2. 可同时干扰多个不同的基因
例1:凋亡基因Bcl-2家族促凋亡基因包括Bak、Bad、Bid、Bax和Bcl-xs五个基因。关闭Bcl-2家族某一基因对于一些细胞凋亡调控不理想。如果同时关闭Bcl-2家族5个基因中的4个,则凋亡率会低得多。制备4个针对Bcl-2家族不同基因的shRNA结构单元,mU6-shRNA1针对 Bak; h U6-shRNA2针对Bad ; h H1-shRNA3 针对 Bid;h 7SK-shRNA4针对 Bax。构建到同一质粒载体上,导入细胞,提高细胞抵抗 凋亡因子。
 

 
例2:Ha-ras和c-myc二个癌基因可以协同作用促进肿瘤的转化、恶化和转移(http://www.ebiotrade.com/newsf/2006-11/2006111785922.htm)。AEG-1是Ha-ras和c-myc下游共同的靶分子。AEG-1被癌基因诱导后活化磷酸肌醇-3激酶的活化,Ha-ras又受到c-myc的调节。上述途径共同导致了肿瘤的恶化。使用RNAi技术单独关闭Ha-ras或c-myc均难以达到关闭癌基因的目的。利用一个载体编码多个shRNA技术,一个shRNA针对Ha-ras,一个针对c-myc,一个shRNA针对AEG-1、一个shRNA针对磷酸肌醇-3激酶。有可能实现对Ha-ras和c-myc的关闭,效果更好(本实验未实施,仅共参考)。
 

 
服务内容:
1. 一个载体编码四条针对同一基因的shRNA以减少筛选工作量或提高抑制效率。
 
2. 一个载体编码四条针对不同基因的shRNA。
 
实验步骤及周期:
  制备一个载体四条shRNA的质粒所需时间为15个工作日
 
客户须知:
1.  所得质粒溶解在DEPC水中,应放在-20℃冰箱保存
2.  已转化质粒菌液应加50%甘油,-70℃冰箱保存
 
服务承诺:
1.  保证每条ShRNA编码序列都正确无误
2.  我们会提供测序结果电子版和彩图版
 
服务价格:
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